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免疫組化分幾步呢?
更新時間:2020-07-23 點擊次數:1599

1.切片,烤片60℃,1h;

2.脫蠟及復水:二甲苯10min,100%乙醇5min,95%乙醇5min,90%乙醇5min,85%乙醇5min,80%乙醇5min, 75%乙醇5min,60%乙醇5min,50%乙醇5min,30%乙醇5min,自來水1min,雙氧水1min;

3.1份30%H2O2加10份蒸餾水,室溫10min,蒸餾水洗3次,每次3min;

4.微波修復:將切片浸入0.01M枸櫞酸緩沖液,微波中大火力(98℃-100℃)加熱至沸騰,冷卻(約5-10min),反復兩次;

5.將切片自然冷卻至室溫,PBS洗滌3次,每次5min;

6.封閉,5%BSA,室溫20min,甩去多余液體;

7.滴加一抗,37℃,1h,或者4℃過夜;

8.PBS洗滌3次,每次3min;

9.滴加二抗,37℃,15-30min;

10.PBS洗滌3次,每次3min;

11.滴加SABC,37℃, 30min;

12.PBS洗滌3次,每次5min;

13.1ml蒸餾水中分別滴加顯色劑,混勻;

14.DAB顯色劑配置好后,滴加于切片,室溫,鏡下檢測反應時間(約5min);

15.自來水沖洗干凈,過蒸餾水;

16.蘇木素復染2min,自來水沖洗;

17.脫水:30%乙醇3min,50%乙醇3min,70%乙醇3min,80%乙醇3min,90%乙醇3min,95%乙醇3min,100%乙醇3min,二甲苯20min;

18.樹膠封片,鏡檢。

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